武漢大學(xué)人民醫(yī)院陳謙學(xué)教授團(tuán)隊(duì)、葉青松教授團(tuán)隊(duì)、南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院鄢博士團(tuán)隊(duì)及友芝友醫(yī)療吳高博士團(tuán)隊(duì)合作的研究成果，在美國(guó)神經(jīng)外科醫(yī)師協(xié)會(huì)（AANS）官方會(huì)刊Journal of Neurosurgery（世界神經(jīng)外科臨床研究領(lǐng)域影響排名第一的雜志）上發(fā)表。
通過多中心隊(duì)列研究，使用友芝友醫(yī)療CTCBIOPSY系統(tǒng)在膠質(zhì)瘤患者檢測(cè)CTC（循環(huán)腫瘤細(xì)胞），證明CTC及CTM（循環(huán)腫瘤微栓）為腦膠質(zhì)瘤臨床診斷和預(yù)后的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子；在膠質(zhì)瘤患者腦脊液中檢測(cè)到大量CTC和CTM，為外周血的100倍左右；在腦膠質(zhì)瘤中首次證實(shí)，術(shù)后CTC水平為MRD（微小殘留病灶）評(píng)估的可行方法。
發(fā)表單位：武漢大學(xué)人民醫(yī)院、南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院、友芝友醫(yī)療
發(fā)表雜志：Journal of Neurosurgery（IF：4.1）
研究目的：研究CTC和CTM在彌漫性膠質(zhì)瘤的診斷和預(yù)后預(yù)測(cè)價(jià)值
檢測(cè)方法：采用CTCBIOPSY檢測(cè)系統(tǒng)分離CTC和CTM
樣本來源：收集63例行全切除的彌漫性膠質(zhì)瘤患者，20例無腫瘤健康者作為對(duì)照
研究結(jié)果：
（1） CTC和CTM在膠質(zhì)瘤的診斷。以健康者CTC水平確定檢測(cè)閾值為2個(gè)CTC/5ml，膠質(zhì)瘤患者CTC陽性檢出率為84.13%（53/63），顯著高于健康者CTC水平，基于CTC診斷膠質(zhì)瘤的AUC（曲線下面積，衡量診斷性能優(yōu)劣指標(biāo)）值為0.939。膠質(zhì)瘤中CTM的侵襲性和轉(zhuǎn)移性更強(qiáng)，檢出率為38.1%（24/63），基于CTM的診斷模型AUC值為0.69。
（2）探究CTC和CTM與外周免疫之間的相關(guān)性。分析顯示在彌漫性膠質(zhì)瘤或GBM（膠質(zhì)母細(xì)胞瘤）中未發(fā)現(xiàn)CTC水平或CTM與外周免疫狀況之間的相關(guān)性，而在CTM陽性患者的腦脊液中觀察到大量CTC和CTM，大約是外周血的100倍，其中CTM與親代腫瘤具有較高的相似性，推測(cè)CTM可能直接來源于親代腫瘤，產(chǎn)生于進(jìn)入外周循環(huán)之前。
（3）探究CTC與膠質(zhì)瘤病理診斷的相關(guān)性。分析顯示CTC水平與WHO分級(jí)、亞型、IDH狀態(tài)、1p19q狀態(tài)和ATRX狀態(tài)顯著相關(guān)，CTC高水平代表著彌漫性膠質(zhì)瘤較差的預(yù)后，基于CTC水平診斷GBM的AUC值為0.768（閾值為4.5個(gè)/5mL）。此外，發(fā)現(xiàn)CTM與KPS（Karnofsky功能狀態(tài)量表）評(píng)分存在弱負(fù)相關(guān)性（r=-0.28，P<0.05）。
（4）探究CTC和CTM狀態(tài)與膠質(zhì)瘤患者的生存相關(guān)性。彌漫性膠質(zhì)瘤中CTC低水平患者的OS（p=0.038）顯著獲益，CTM陰性是彌漫性膠質(zhì)瘤和GBM（腦膠質(zhì)瘤）的良好預(yù)后因子，CTM陰性患者的PFS和OS均獲益。ROC曲線分析顯示，CTM預(yù)測(cè)彌漫膠質(zhì)瘤的AUC值為0.82（6個(gè)月生存）、0.75（1年生存）、0.6（2年生存），預(yù)測(cè)GBM的AUC值為0.81（6個(gè)月生存）、0.87（1年生存）、0.71（2年生存）。
進(jìn)一步進(jìn)行生存分析，從10個(gè)有統(tǒng)計(jì)意義的單因素中篩選出6個(gè)進(jìn)行多因素分析，Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型顯示，1p19q狀態(tài)（p=0.015）、KPS評(píng)分（p=0.01）、Ki-67指數(shù)（p=0.039）和CTM狀態(tài)（p<0.001）是膠質(zhì)瘤的獨(dú)立預(yù)后預(yù)測(cè)因子。基于這些發(fā)現(xiàn)，研究者開發(fā)了一個(gè)基于6因素的彌漫性膠質(zhì)瘤生存預(yù)測(cè)模型，驗(yàn)證準(zhǔn)確性達(dá)0.823。在GBM中，Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型顯示CTM和KPS評(píng)分是GBM的獨(dú)立預(yù)后預(yù)測(cè)因子，基于此研究者開發(fā)了一個(gè)簡(jiǎn)單的無創(chuàng)預(yù)測(cè)模型，可以在患者術(shù)前快速評(píng)估患者結(jié)局，驗(yàn)證準(zhǔn)確性為0.770。
（5）探究術(shù)后CTC水平和CTM狀態(tài)與治療反應(yīng)的相關(guān)性。29例患者術(shù)前和術(shù)后均接受CTC檢測(cè)，結(jié)果顯示，術(shù)后CTM陽性比例和CTM水平顯著增加，手術(shù)本身可能會(huì)促進(jìn)CTM進(jìn)入外周循環(huán)；術(shù)后CTC陽性比例降低，但CTC檢測(cè)水平無明顯變化。進(jìn)一步進(jìn)行Pearson和Spearman相關(guān)性分析，顯示術(shù)后CTC水平與P53基因突變（p<0.001）和KPS評(píng)分（p<0.05）有強(qiáng)相關(guān)性，此外GBM中CTC水平與外周血淋巴細(xì)胞比例密切相關(guān)（P<0.05），因此利用術(shù)后CTC水平監(jiān)測(cè)患者的治療反應(yīng)和免疫狀況可能是一種有前景的新方法。
（6）探究術(shù)后CTC水平結(jié)合CTM狀態(tài)預(yù)測(cè)患者預(yù)后的價(jià)值。生存分析顯示，在彌漫性膠質(zhì)瘤中術(shù)后CTC高水平與較差的OS（p=0.039）顯著相關(guān)，在GBM患者中術(shù)后高CTC水平與較差的PFS（P=0.0017）和OS（P=0.00044）顯著相關(guān)。然而，手術(shù)可能導(dǎo)致CTM釋放從而降低CTM的預(yù)后價(jià)值，鑒于術(shù)前CTM的預(yù)后重要性，同時(shí)評(píng)估術(shù)后CTC水平和CTM可能比單獨(dú)評(píng)估CTC/CTM的可行性更高。將患者分為高CTC/CTM陽性組（n=11）和CTM陰性組（n=18），分析顯示CTM陰性組顯示出明顯的生存獲益（p=0.00067），在彌漫性膠質(zhì)瘤和GBM中高CTC/CTM陽性組均顯示出更差的PFS和OS。
進(jìn)一步進(jìn)行生存分析，從12個(gè)單因素中利用LASSO分析排除后，最終篩選5個(gè)因素（術(shù)后高CTC/CTM陽性狀態(tài)、1p19q共丟失、Ki-67指數(shù)、術(shù)后淋巴細(xì)胞比例、術(shù)后中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值）進(jìn)行多因素分析，顯示術(shù)后高CTC/CTM陽性狀態(tài)、1p19q狀態(tài)是彌漫性膠質(zhì)瘤的獨(dú)立預(yù)后預(yù)測(cè)因素，基于5個(gè)因素構(gòu)建了高準(zhǔn)確性的彌漫性膠質(zhì)瘤預(yù)后預(yù)測(cè)模型（驗(yàn)證準(zhǔn)確性達(dá)0.895）。
最后在研究討論部分，研究指出術(shù)后CTC水平可以預(yù)測(cè)患者的MRD，并首次在膠質(zhì)瘤提出使用術(shù)后CTC水平評(píng)估MRD為可行的方法。MRD概念來源于白血病，指誘導(dǎo)化療（或骨髓移植治療）后完全緩解，但患者體內(nèi)仍有白血病腫瘤細(xì)胞的痕跡。近年來，循環(huán)腫瘤生物標(biāo)志物已被廣泛應(yīng)用于實(shí)體瘤，通過治療后的MRD來評(píng)估復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，特別是膠質(zhì)瘤的彌漫性生長(zhǎng)模式導(dǎo)致整個(gè)組織學(xué)切除困難，因此臨床上對(duì)MRD監(jiān)測(cè)有迫切需求。MRI（磁共振成像）已被證明不夠敏感，而外周循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA）檢測(cè)率在彌漫性膠質(zhì)瘤中不令人滿意。在這項(xiàng)研究中，患者術(shù)后CTC水平顯示出明顯更好的生存獲益，當(dāng)與術(shù)后CTM狀態(tài)相結(jié)合時(shí)，CTC水平與患者生存率顯示出顯著的相關(guān)性。多項(xiàng)研究已經(jīng)表明CTC可用于評(píng)估放射治療效果，并且對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤的復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)優(yōu)于MRI。因此，CTC有助于監(jiān)測(cè)彌漫性膠質(zhì)瘤的腫瘤進(jìn)展，為術(shù)后CTC水平檢測(cè)的進(jìn)一步臨床應(yīng)用奠定了堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)，包括MRD評(píng)估、治療反應(yīng)和腫瘤進(jìn)展監(jiān)測(cè)。